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酵母培养物及其在反刍动物中的应用

发表日期:2022-06-02发表者:

酵母培养物是指在特定工艺条件控制下由酵母菌在特定的培养基上经过充分的厌氧发酵后形成的微生态制品,它主要由酵母细胞外代谢产物、经过发酵后变异的培养基和少量已无活性的酵母细胞所构成。代谢产物是对细胞外各类代谢物的总称,这其中有些物质是为人们所熟悉的,如肽、有机酸、寡糖、氨基酸、增味物质和芳香物质等,还有许多为人们所不熟悉的但实践证明对促进畜禽生长有益的未知生长因子等物质。长达几十年的科学研究和生产应用实践证明,酵母培养物中所含有的细胞外代谢产物可明显提高反刍动物的生产力水平、优化饲料的营养价值、改善动物的健康状态。同时人们围绕酵母培养物在反刍动物中的作用机理也进行了大量的研究工作,多数学者认为酵母培养物主要是通过其中的代谢产物来提高瘤胃中微生物的数量和活力,从而改善瘤胃发酵、提高饲料的消化和利用效率,最终起到提高动物生产性能的作用。本将从瘤胃微生物区系、瘤胃发酵功能、养分的摄入与利用等方面对酵母培养物在反刍动物中的作用机理与应用加以综述,以期人们对酵母培养物能有一个全新的认识。

酵母培养物对瘤胃微生物区系的影响

许多研究者认为酵母培养物的作用在于其能改变瘤胃发酵和微生物区系(WilliamsNewbold, 1990Dowson1992Newbold1996Wallace1996)、增加瘤胃中细菌数(WallaceNewbold1992)、提高菌体蛋白合成、改善菌体AA组成(BeharkaNagaraja1991DawsonHopkins1991Erasmus等,1992)。虽然Doreau等(1998)认为,酵母培养物并不影响细菌间的平衡。但很多学者认为酵母培养物能选择性刺激瘤胃特定微生物,从而改变微生物区系。其中,最一致的报道是提高厌氧菌和纤维分解菌数量(Wiedmeier等,1987Harrison等,1988NewboldWallace1992)。也有研究表明酵母培养物能提高乳酸利用菌(Edwards1990Girard等,1993)、蛋白分解菌(YoonStern1996)以及噬氢产乙酸菌(Chaucheyras等,1995b)的浓度。另外,酵母培养物还可提高瘤胃内消化纤维的真菌(Chaucheyras等,1995a)及原虫(Plata, 1994)的活性。瘤胃内有益微生物菌群浓度的增加及微生物活性的提高,有利于粗纤维及其它营养物质的消化,以及破坏、降解能导致瘤胃失衡的代谢中间产物。酵母培养物能刺激特定菌群生长的能力与许多对瘤胃内生理代谢的影响报道一致,也解释了提高蛋白合成、改善瘤胃稳定性及改善微生物蛋白合成等。

1.1 纤维分解菌

酵母培养物可提高瘤胃厌氧微生物,特别是纤维分解菌的浓度。体外研究表明,酵母培养物可直接刺激瘤胃厌氧微生物、纤维分解菌的生产与繁殖(Wiedmeier等,1987Harrison等,1988NewboldWallace1992)。Wiedmeier1987)报道,补饲酵母培养物的非泌乳牛瘤胃总活菌数与纤维分解菌也显著上升。Harrison等(1988)研究表明,为产后8周的泌乳奶牛提供酵母培养物(由Diamond V Mill提供),其瘤胃液中的纤维分解菌数量(cellulytic bacteria count)由对照组的(6.6×107)增至(12.0×107)MPN/mlDawson1990)在以粗料为基础的模拟瘤胃培养基中补加酵母菌,发现其中纤维分解菌数显著提高。进一步试验表明,补饲酵母培养物的阉公牛瘤胃厌氧微生物与纤维分解菌数量显著增加。Wienmeier1987)报道,补饲酵母培养物的非泌乳奶牛瘤胃总活菌数与纤维分解菌数显著增加。Callaway(1997)报道,在只加纤维二糖6g/l的介质中添加酵母培养物滤液,能刺激纤维分解菌F.succinogenes S85R.flavefaciens FD1R.albus B199对纤维二糖的利用。瘤胃内纤维分解菌与微生物总数增加,有助粗纤维及其它营养物质的消化,从而促进反刍动物生产性能的提高。

1.2 乳酸利用菌

酵母培养物含有大量的氨基酸、葡萄糖、B族维生素、有机酸(苹果酸、甲酸、琥珀酸、天冬氨酸)等。而某些瘤胃微生物生长、代谢也需要这些营养物质,如乳酸利用菌(S.ruminatiumM.elsdenii)。Girard 1993)报道,在高精料水平时,添加酵母培养物不但能增加乳酸利用菌浓度,也增加乳酸利用速率。Edwards1991)报道,给饲喂高能量的育肥肉牛补饲酵母培养物能增加乳酸利用菌的浓度。NisbetMartin1991)发现,细菌纯培养时酵母培养物能刺激S.ruminatium的生长。CallawayMartin1997)报道,在含DL-乳酸、Tryptioase和酵母培养物各5g/l的介质中培养S.ruminatiumHD4,向培养基中加入1%5%酵母培养物滤液,能刺激S.ruminatium HD4生长,分别提高7%15%;而在只加入5g/l DL-乳酸的培养基中,1%5%酵母培养物滤液能刺激S.ruminatium HD4H18M.elsdenii B159T81的生长,酵母培养物滤液增加S.ruminatium HD4的乙酸及总VFA产量,增加S.ruminatium H18的丙酸及总VFA产量。

瘤胃混合菌能快速利用有机酸(延胡索酸和苹果酸)及天冬氨酸。酵母培养物滤液含有苹果酸,而苹果酸能刺激乳酸利用菌S.Ruminatium的生长。Linehan等(1978)发现,S.Ruminantium HD4在乳酸盐介质中生长还需L-天门冬氨酸(Asp)、CO2P-氨基苯甲酸和生物素,其中,天门冬氨酸可由L-苹果酸或延胡索酸替代。NisbetMartin1990)发现,天门冬氨酸、延胡索酸、苹果酸都能刺激S.ruminatium HD4对乳酸的利用,其中以苹果酸刺激效果最为明显。Nisbet等(1991)发现,不同水平L-苹果酸能刺激S.ruminantium HD4对乳酸的利用,但10mM水平时效果最大。Henderson(1980)发现,S.ruminantium WPL 151/1H2环境含葡萄糖中生长时,使介质中琥珀酸产量显著增加,这表明S.ruminantium WPL151/1中含有延胡索酸还原酶,因为苹果酸和延胡索酸都是这种细菌随意(randomizing)途径合成琥珀酸的前体物。可以推测,S.ruminantium HD4利用苹果酸或延胡索酸而生长的能力,与细胞外H2的存在密不可分。

1.3 其它微生物

有关酵母培养物对蛋白分解菌的影响的报道并不多见。YoonStern1996)发现,酵母培养物可刺激蛋白分解菌生长(3.09vs2.00×108/ml)。

瘤胃中,H2是由纤维分解菌如瘤胃球菌(R.albusR.flavefaciens)、瘤胃杆菌(B.succinogenesB.ruminocola)及厌氧真菌等分解植物细胞壁而产生的中间产物。但是,H2在瘤胃内并不积累,这是由于瘤胃内H2利用中占优势的产甲烷菌将其合成甲烷,虽然产乙酸菌也能利用H2并生产乙酸,但瘤胃中产乙酸菌H2的竞争力远低于产甲烷菌,这样,大部分H2就以甲烷的形式损失掉了。

Chaucheyras等(1995a)在研究活酵母对人工瘤胃中两种吃H2微生物——产乙酸菌、产甲烷弧形菌的影响时发现,添加活酵母能将产乙酸菌的吃H2 hydrogenotrophic)代谢及乙酸产量提高5倍多;而在不加酵母的对照组以及产乙酸菌及产甲烷菌的混合组中,H2主要用于合成甲烷,而一旦加入活酵母后,则刺激产乙酸菌H2的利用能力。这表明,添加酵母能提高产乙酸菌H2利用的竞争力,同时也就减少甲烷损失。

厌氧真菌占瘤胃微生物菌群8%,对瘤胃中纤维物理性降解有重要作用(OrpinJoblin,1989)。瘤胃内真菌主要附着于植物性颗粒上,特别是附着在很难被细菌降解的木质素-纤维素交联组织如(sclerenchymacribro-vascular,并对其由一定的降解作用,为其它菌种对纤维进一步降解提供条件。然而,当动物饲料充足时,真菌对底物的吸附、利用很有限,其促生长作用也有限,这是由底物类型及质量决定,或是由于真菌与瘤胃微生态系统中其它微生物对此底物竞争的结果。Chaucheyras等(1995)在研究活性酿酒酵母对瘤胃厌氧真菌(Neocallimatix Frantalis MCH3)的影响时发现,当向不含维生素的介质中加入酵母后,能刺激真菌孢子产生及纤维分解能力,结果使发酵产物如H2、甲酸、乳酸、乙酸等的浓度增加,这表明,酵母能提高Neo frantalis对植物细胞壁的附着。经活酵母刺激后,真菌在瘤胃内降解富含木质素-纤维素的饲草的能力就提高了。WelchCalza(1993)发现,另一种真菌制剂米曲霉发酵提取物能刺激与N.Frantalis MCH3非常相似的真菌N.Frantalis EB188的生长及纤维分解酶的产生。

Demeyar(1981)认为,瘤胃中30%-40%的纤维消化是由纤毛虫完成的。Plata(1994)报道,SC添加能增加原虫数。而Doreau(1998)给日粮为60%玉米青贮和40%精料的泌乳早期奶牛补饲SC0.5g/d头,发现SC添加后9h,均毛科(Isotrichide)中最具代表性的均毛属(Isotricha)数目增加(7.00vs2.00×103/ml,P<0.05),但对头毛科(Ophryoscolocidae)的代表属内毛属(Entodinium)、前毛属(Epidinium)、均毛属(Diploplastron)没有影响,但添加后9h11h15h的平均值没有差异,原虫总浓度也没有差异。原虫中头毛科约占90%。另外,Newbold (1992)认为瘤胃纤维消化增加最可能是细菌作用而不是真核生物作用。但更多的报道是YC添加对原虫没有影响Newbold,1992Kumar, 1994,1997Newbold,1995YoonStern,1996)

酵母培养物对瘤胃发酵的影响

2.1 酵母培养物对瘤胃VFA的影响

瘤胃VFA产量常作为评定酵母培养物刺激瘤胃发酵的指标(GrayRyan,1988Martin,1989)。大量研究表明酵母培养物能改变瘤胃发酵方式。Williams1991)报道,添加酵母培养物对瘤胃总VFA浓度没有影响,而乙酸、丙酸从3.31降到2.81,对戊酸或支链VFA比例没有影响。添加酵母培养物使乙酸、丙酸比例降低的报道较多(Harrison等,1988Williams,1989,1991Erasmus等,1992Besong等,1996)。相反,YC添加使乙酸、丙酸比例升高的报道也有许多(Wiedmeier等,1987Gomez-Alaecon等,1990 蒿迈道,1993Piva,1993)

酵母培养物对瘤胃VFA的影响明显随添加时间和日粮类型而变化。Kumar等(1997)向水牛犊牛高粗料日粮中添加酵母培养物发现,采食后4hVFA显著增加(124.6vs111.5mmol/l,P<0.01),乙酸显著增加(81.3vs70.8,P<0.01),乙酸、丙酸比例增加(3.73vs3.25,P<0.05),丁酸及异丁酸增加(17.8vs15.1),戊酸减少(1.65vs1.93),异戊酸减少(1.50vs1.81)。SullivanMartin1999)报道,向人工瘤胃中添加酵母培养物,当底物为玉米碎粒时,对VFA产量及其比例没有影响;底物为苜蓿干草时,乙酸、丙酸比例增加;底物为海岸狗牙根时,乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、异戊酸及CH4产量增加,VFA产量增加,乙酸、丙酸比例降低。

但也有一些体内、体外试验表明,酵母培养物对总VFA浓度及各种VFA的比例没有影响(Harrison,1988Williams,1991Caton,1993Higginbotham,1994YoonStern,1996)。

2.2 酵母培养物对瘤胃乳酸及pH的影响

快速发酵碳水化合物在瘤胃内的迅速发酵所产生的大量有机酸导致pH值下降,抑制纤维分解菌活动,从而抑制动物对营养物质特别是对粗纤维的消化利用,严重时导致瘤胃功能失调。所以,促进微生物对乳酸的利用,增加瘤胃pH值具有重要意义。当动物采食高能量日粮时,低水平的乳酸浓度常表明较高的瘤胃液pH ,也表明瘤胃发酵十分稳定。研究发现酵母培养物对稳定瘤胃发酵和调整瘤胃失衡具有重要作用。酵母培养物可通过减少乳酸产生、增加瘤胃微生物对乳酸利用而防止pH下降(Chaucheyras等,1996 Martin,1992 Michalet-Doreau等,1996)。Williams等(1991)发现,给采食大麦的奶牛补饲酵母培养物后4hpH值增加(P<0.05),这种增加可能是由于YC添加组瘤胃液L-乳酸浓度下降的缘故(1.43vs3.55mM,P<0.01);而对照组瘤胃液中L-乳酸的最大浓度(7.75mM)刚好与最低pH值吻合。Kumar等(1997)向采食干草(2.12kg/d头)和精料(0.45kg/d头)的犊牛添加YC5g/d头)发现,在第4周时,添加酵母培养物组饲喂后6h瘤胃液pH显著高于对照组(6.55vs6.46,P<0.05),而撤消酵母培养物两周后,二者没有差异。Erasmus(1992)发现,YC对瘤胃pH没有影响,但能将乳酸浓度峰值降低(1.93vs1.73mM)。但Doreau等(1998)给采食60%玉米青贮、40%精料的泌乳早期奶牛补饲酵母培养物,并不影响瘤胃pHWilliams等(1991)认为,当日粮富含高能量饲料时,酵母培养物可能减少一定时间内pH的差异。YC添加对瘤胃pH值的影响变化不大的原因可能是,酵母培养物刺激乳酸利用菌生长,使乳酸浓度下降,同时刺激别的菌种对NH3的利用,使NH3浓度下降,由于乳酸和NH3浓度同时下降,使pH值变化不大。而二者浓度下降的幅度相差异及时间相差异,也就可以解释瘤胃pH值各种变化的原因了。酵母培养物防止乳酸在瘤胃内积累的能力也表明其对克服高产奶牛、快速生长肉牛因采食高能量日粮而带来的不利影响有切实可行的作用。

2.3 酵母培养物对瘤胃NH3-N的影响

大量研究表明酵母培养物可显著降低瘤胃内NH3-N浓度(Dawson1987WilliamsNewbold1990Harrison1988HenicsGombos1991Piva1993Kumar等,1994)、改善瘤胃氮代谢。YoonStern1996)发现,添加酵母培养物可使CP瘤胃降解率增加(P<0.1),使十二指肠NAAN流量增加(P<0.05)。酵母培养物刺激微生物生长,常表示瘤胃微生物NH3利用增加。NH3水平降低,并不是由蛋白质降解或脱氨作用降低引起的(WilliamsNewbold, 1990),而是由于酵母培养物刺激瘤微生物菌群摄取NH3并合成蛋白引起的。这反映在添加酵母培养物后,瘤胃内氨态氮浓度较低,同时,瘤胃细菌浓度增加。另外,这些变化反映在小肠细菌氮流量增加(Erasmus,1992)。氮流量变化也就意味着AA流向的变化,其中蛋、胱、丝、苏的含量明显提高。瘤胃微生物菌体蛋白流量的增加,意味着酵母培养物能刺激瘤胃微生物生长,提高NH3-N转化为微生物菌体蛋白的效率。

但也研究表明,添加酵母培养物后瘤胃NH3浓度并不降低(Wiedmeier等,1987Carro等,1992Hession等,1992),甚至增加瘤胃NH3浓度(Arambel等,1987Martin等,1989),对微生物菌体蛋白合成及流量也没有影响(Carro等,1992Doreau等,1998)。

酵母培养物对消化和采食量的影响

3.1 酵母培养物对瘤胃消化的影响

许多研究者一致认为添加酵母培养物对瘤胃发酵有显著影响,对消化也有许多益处。几个实验室的研究表明,添加酵母培养物可影响瘤胃内消化途径(WilliamsNewbold,1990Dawson,1992Newbold,1996Wallace,1996),增加DMNDFADF、纤维素、半纤维素、CP的瘤胃消化率(Campos,1990)及全消化道消化率(Ayala,1992Eramus,1992),这种消化率的改善与酵母培养物刺激瘤胃微生物生长及其活性直接相关(Wiedmeier,1987Edwards,1991)。

瘤胃中纤维的消化主要依赖纤维分解菌的生物活性。当瘤胃中pH值维持在大于或等于6.0的水平时,这些微生物能够摄取纤维里的大部分能量。酵母培养物通过滋养一个拥有丰富的纤维分解活性微生物的瘤胃,从而帮助奶牛提高对纤维的消化率。为提高产奶量,通常都会在日粮中添加谷物。但是迅速发酵的谷物为瘤胃微生物提供底物,会产生乳酸并降低瘤胃pH值。当pH值低于6.0时,纤维分解菌的生长就会受到抑制。研究表明通过添加酵母培养物有助于促进瘤胃中乳酸分解菌的生长从而降低乳酸在瘤胃中的积累。由于瘤胃中对乳酸的分解能力增强,从而使得pH值高于6.0,纤维的消化率也因此提高。,美国达农威公司通过对酵母培养物(益康XP)长期的生产实践和大量的科学研究证实,酵母培养物可将瘤胃内有益微生物菌群的总数增加30%,其中参与分解纤维物质和干草的细菌数目可增加6070%,从而使得饲料通过胃部的速度提高13.1%;粗蛋白质消化率提高3%;脂肪消化率提高3.7%;酸性洗涤纤维消化率提高10.4%;木质纤维消化率提高35.7%

3.2 酵母培养物对小肠营养流量的影响

酵母培养物影响纤维消化速率和菌体蛋白合成,从而影响小肠食糜营养成分。Williams等(1989)报道,补祠酵母培养物使十二指肠与回肠末端的DMNAN表观吸收率分别提高35%23%,增加DMNAN十二指肠流量,而对回肠末端流量没有影响。他们认为NAN流量及吸收率增加主要是由于可利用菌体蛋白小肠流量增加的缘故。Carro等(1992)发现,奶牛添加酵母培养物,使非降解N十二指肠流量增加,而NAN和微生物菌体N十二指肠流量并不显著增加。

十二指肠食糜AA组成在很大程度上影响决定奶牛产奶量及蛋白产量的各种可利用AAYoonStern,1995)。关于限制产奶量的限制性AA,还未统一意见,但是非降解蛋白源组成已用来调控十二指肠食糜AA组成。当饲喂推荐量的非降解蛋白时,瘤胃中菌体蛋白AA组成相对稳定。YoonStern(1995)认为酵母培养物刺激瘤胃微生物生长,并提高菌体蛋白合成,并能给高产动物提供所需的特定的限制性AAErasmus等(1992)报道,添加使奶牛菌体蛋白合成有增加趋势,奶牛增加YC后,十二指肠的17AA4种氨基酸(MetCysThrSer)浓度显著增加,其中Met增加41~58g/d,而Glu浓度降低,表明添加酵母培养物可影响流出瘤胃的细菌蛋白的AA组成,这可能是酵母培养物选择性刺激某些厌氧菌生长的缘故(Dawson等,1990Erasmns等,1992)。由于数据有限,还不能解释细菌组成变化与十二指肠AA组成变化的相关性方向。

3.3 酵母培养物对采食量的影响

奶牛摄入的饲料越多,能够得到的能量就越多,产奶量也就越多。由于采食量是促进产奶的直接动力,因此营养学家和养牛户都千方百计提高牛的干物质采食量。在较高的干物质进食水平下,通过促进瘤胃的发酵或微生物的活动,使得奶牛能够最大限度地利用饲料中所含的养分。微生物菌群能消化饲草、纤维和淀粉,正是它们才使得奶牛能够利用饲料中的养分。
一些独立的研究机构、大学和供应商所进行的研究结果都证实,在奶牛日粮中添加酵母培养物产品是非常有益的,主要表现在干物质采食量提高和产奶量增加。通过对过去41组试验统计来看,YC添加使DMI变化范围为-4.4%-27.3%,使DMI平均增加2.65%;其中19组产生负效应,使DMI平均减少2.53%22组产生正效应,使DMI平均增加7.1%Newbold1990)认为添加酵母培养物增加采食量,能为增加产奶量提供足够的能量。Olson等(1994)报道,添加酵母培养物可增加放牧牛随意先择性采食量。在伊利诺斯大学做的一个关于过渡期奶牛的试验表明试验组奶牛的干物质采食量明显较高。伊利诺斯大学的首席研究员Mike Hutjens博士的研究结果表明日粮中添加酵母培养物的最佳时间是产犊前2周直到泌乳期的前40~50d。试验还表明,试验组的奶牛在泌乳初期体重的损失更少。这些奶牛在产犊后干物质采食量提高更快,泌乳高峰到来更早。

酵母培养物对奶牛生产性能的影响

通过综合过去43组试验,添加酵母培养物使3.5%FCM产奶量变化范围为-7.3%~17.5%,平均为5.05%8组产生负效应,平均为-2.7%35组产生正效应,平均为6.08%1995ShaverGarrett对美国威斯康星州的11个商品奶牛场作了一个试验,研究酵母培养物对产奶量、牛奶成分组成和组分产量的影响。试验结果显示把酵母培养物添加到泌乳高峰期后的奶牛日粮中去会影响产奶量。但所产生的经济效应会因原料成本和牛奶价格的差异而有所不同。研究表明添加酵母培养物会有1:2~1:3的投资回报(假设干物质的采食量提高了相当于产奶增加量的35%)。整个试验用了大约1 500头牛,其中1 200头正处于泌乳期,每头牛的年平均产奶量在10 000~12 700kg之间。最近,刘凯等(2004)利用酵母培养物(达农威益康XP)对泌乳前期奶牛的产奶量影响的研究表明,添加酵母培养物使泌乳前期奶牛产奶量平均提高2.10kgP<0.05),差异显著。王先生和他同事在俄亥俄州大学所作的一个研究中发现:对于泌乳31~140d的牛群而言,在日粮中含有21%的中性洗涤纤维(NDF)和酵母培养物会明显提高奶牛的干物质摄入量、实际产奶量、3.5%脂肪校正产奶量和乳脂率。这个试验说明了日粮中含有适当比例的非结构性碳水化合物(NSC)的重要性。而那些日粮中所含非结构性碳水化合物少于37%38%这个最佳比例的试验组牛群未能显示出足够的正效应。很显然,只有给奶牛饲喂结构合理并且能量充足的日粮才能达到令任满意的经济效果。另外,添加酵母培养物对乳组成的影响也不一致。YC添加能使乳脂率提高5.77%~33.46%,乳蛋白率略有增加,乳糖含量有增有降,总固形物显著增加(王士长,1999;吴子林,1996;蒿迈道,1994)

小结

饲养健康的奶牛和提高产奶量是养殖者所追求的最大经济目标。通过科技的进步和长期的生产实践,越来越多的奶牛养殖者意识到养好奶牛的关键在于调理好奶牛的瘤胃。只有具备良好瘤胃功能的奶牛,才能够最大限度地发挥出它作为高效转换动物的生产天性。事实上,奶牛瘤胃本身并不能够直接对饲料进行转换合成(消化吸收)。真正参与分解消化食物活动的是瘤胃内的微生物菌群。瘤胃中存在着无数的微生物,一般来讲,每毫升瘤胃液中约有细菌400亿~500亿之多,原虫的数量也在几千万以上。这些微生物能够利用粗饲料并通过其自身的繁殖,生成大量且便于奶牛利用的微生物蛋白,甚至将一些氮素转化成必需氨基酸,合成许多必需的维生素,其中包括维生素B族,它们还能够将纤维素和戊聚糖分解成乙酸、丙酸和丁酸,使得这些短链的脂肪酸通过胃壁吸收为奶牛提供约75%的能量。既然瘤胃中大量的微生物菌群参与对饲料的消化过程,因此,如果微生物在瘤胃中能够得到恰当的培养,不仅能够提高饲料报酬,还能够保障奶牛的营养需要和体质健壮。换句话说,饲养奶牛的关键在于养好瘤胃中的有益微生物菌群。酵母培养物中的代谢产物具有明显刺激牛瘤胃中纤维素菌和乳酸利用菌的繁殖;改变瘤胃发酵方式;降低瘤胃氨浓度;提高瘤胃微生物蛋白产量和改善饲料消化率等的作用,从而使能够从饲料中下载更多的养分来满足奶牛生长和生产的需要,达到提高生产性能和改善动物健康状况的作用。